2024-06-20 科技 1
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PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外95的高温下变性成为单链。在低温下(通常在60左右),引物和单链根据碱基互补配对的原理结合。然后调节温度到DNA聚合酶的最适反应温度(72左右),DNA聚合酶沿着从磷酸到戊糖(5’-3’)的方向合成互补链。(来自百度百科)
实时定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时监测整个PCR过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。(来自百度百科)
普通PCR和实时荧光定量PCR的区别在于荧光染料(SYBR Green或Taqman探针等。)被添加到实时荧光定量PCR系统中。以SYBR Green为例,这种染料可以与双链DNA结合。连续进行PCR时,每次退火产生的双链DNA也在增加,结合的荧光染料越多,荧光越强。机器里有一个检测荧光的探头,可以定量检测荧光的强度,转换成数值。这样就可以实时记录系统中DNA的反应。
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